Lukáš Masopust započal svou fotbalovou kariéru v rodném městysu Božejov nedaleko Pelhřimova. Následoval přestup do Kamenice na Lípou, od roku 2004 pak hrál za Jihlavu. V roce 2012 si ho tehdejší trenér vytáhl z dorostu do A-týmu.  V lednu 2015 pak přestoupil do Jablonce, odkud v lednu 2019 zamířil do Slavie. Zahrál si také v národním týmu, ať už v mládežnických reprezentacích, kde hrával za týmy U20 a U21, tak za A-tým, kde debutoval v březnu 2018. Se Slavií v sezoně 2018/19 vyhrál MOL Cup a stal se mistrem ligy.